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在炎熱的夏季，吃一份清爽、簡單又美味的涼皮本應(yīng)是件很幸福的事情。

但是近日，有人食用涼皮中毒的新聞引起了廣大網(wǎng)友的關(guān)注，經(jīng)檢測，導(dǎo)致中毒的罪魁禍?zhǔn)妆闶?strong>米酵菌酸。

01【何為米酵菌酸？】

米酵菌酸是一種細(xì)菌型毒素，是由椰毒假單胞菌屬酵米面亞種產(chǎn)生的毒素，食物中的米酵菌酸主要是由于食物儲存不當(dāng)、環(huán)境條件適宜等因素導(dǎo)致的。

在炎熱的夏季，天氣高溫潮濕，類似河粉、腸粉、粿條、涼皮等濕米粉以及泡發(fā)的銀耳、木耳等食品，容易滋生椰毒假單胞菌從而產(chǎn)生米酵菌酸毒素，而這些食品都有一個共同點，就是要經(jīng)過長時間的浸泡和發(fā)酵。

米酵菌酸這種毒素的環(huán)境適應(yīng)性極強，耐受干燥且不怕高溫，就算用100℃的沸水或高壓鍋蒸煮都不能破壞其毒性，且一旦中毒，致死率高達(dá)40%以上。

因此在夏季，生濕面制品和酵米面制品中米酵菌酸的檢測是及其重要的，美正生物積極響應(yīng)，對米酵菌酸的確證檢測進行重現(xiàn)和驗證，為百姓的食品安全盡一份力。

02【實驗部分】

本實驗依據(jù)GB 5009.189-2016采用固相萃取結(jié)合液相色譜建立了涼皮中米酵菌酸的前處理方法。

樣品經(jīng)甲醇-氨水溶液提取，再用PolyPlus MAX小柱凈化，HPLC檢測，Robussil C18 P色譜柱進行分離，外標(biāo)法定量。

結(jié)果表明，當(dāng)涼皮添加量為0.15?mg/kg時，米酵菌酸回收率為90.3%，能夠滿足檢測要求。

03【樣品制備】

樣品提取

鮮（濕）試樣經(jīng)剪碎，勻漿后稱取10 g，加入80 mL甲醇-氨水溶液，混勻，室溫下避光浸泡1 h，置于超聲波振蕩器中超聲提取30 min，8000 r/min離心5 min（也可以直接過濾），取上清液或濾液40 mL，置50℃水浴中減壓濃縮至約3 mL，待凈化。

樣品凈化

將待凈化液全部轉(zhuǎn)移到用5 mL甲醇和5 mL水已活化的MAX固相萃取柱中，依次用5 mL水和5 mL甲醇淋洗，棄去流出液，抽干萃取柱，再用6 mL 2%甲酸甲醇溶液洗脫，收集洗脫液，于50℃水浴中氮吹至近干，然后加入1 mL 75%甲醇水溶液，渦旋溶解，混勻，經(jīng)有機PTFE針式濾器過濾后進行 HPLC 分析。

04【實驗結(jié)果】

表1.?涼皮基質(zhì)加標(biāo)回收實驗結(jié)果（添加水平0.15 mg/kg，n=3）

同時，為了提升米酵菌酸檢測的靈敏度，美正生物還建立了LC-MS/MS的檢測方法，可提升靈敏度50倍以上，且使用基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液校正，回收率在80% - 100%之間，也能滿足檢測要求。

表2.?LC-MS/MS法檢測涼皮基質(zhì)加標(biāo)回收實驗結(jié)果（n=3）

05【實驗結(jié)論】

美正生物重現(xiàn)國標(biāo)GB 5009.189-2016，使用MAX小柱對涼皮樣品進行了凈化，結(jié)果表明，使用MAX固相萃取小柱凈化后，米酵菌酸回收率均滿足檢測要求且RSD小于10%。說明MAX小柱適用于涼皮中米酵菌酸的檢測，且方法穩(wěn)定。

06【相關(guān)產(chǎn)品】