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有柄涂抹海綿（D/E）適用于致病菌環(huán)境采樣（可能存在酚類消毒劑、季銨鹽類消毒劑、含氯消毒劑、過氧乙酸消毒劑、過氧化氫消毒劑的環(huán)境）。不可用于臨床診斷。

1、實驗時應穿戴一次性手套進行操作，以免外源污染。

2、取出涂抹海綿包裝袋，撕開鋁箔袋（外包裝），取出并標記采樣袋。

3、撕開采樣袋（有密封金屬絲的一側），取出涂抹海綿，取出過程中不可碰觸到涂抹海綿手柄以外的部分或者采樣袋內(nèi)壁。

4、采樣的涂抹面積為25×25cm2，將海綿與待測表面呈30-45°角，Z字型涂抹。對于不規(guī)則的物體表面，無法取得25×25cm2表面積時，應該盡量涂抹足夠的區(qū)域，并保證每次檢測都采用連續(xù)一致的方法。

5、將涂抹海綿放入采樣袋中（手柄接觸部分不可放入），輕輕折斷手柄。

6、向采樣袋中加入對應的增菌培養(yǎng)基，對齊金屬絲后卷曲數(shù)次，將金屬絲沿著袋口進行彎折，進行后續(xù)培養(yǎng)鑒定。