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新霉素介紹

新霉素為氨基糖甙類抗生素的一種，對革蘭氏陰性菌具有較強(qiáng)的抑制作用，所以臨床上廣泛應(yīng)用。由于新霉素具有耳毒性和腎毒性，因此我國農(nóng)業(yè)部規(guī)定了新霉素的最高殘留限量。 本試劑盒是應(yīng)用ELISA技術(shù)研發(fā)而成的檢測產(chǎn)品，具有快速、簡便、準(zhǔn)確和靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，能減少操作誤差和工作強(qiáng)度。

新霉素Elisa試劑盒原理

新霉素Elisa快速檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法，在酶標(biāo)板微孔條上預(yù)包被新 霉素抗原，樣本殘留的新霉素和微孔條上預(yù)包被的抗原競爭抗新霉素的抗體，加入酶標(biāo)二抗，經(jīng) TMB 底物顯色，樣本吸光 度值與其殘留物新霉素呈負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較再乘以其對 應(yīng)的稀釋倍數(shù)，即可得出樣本中新霉素的含量。

新霉素Elisa試劑盒適用范圍?

可定性、定量檢測動物組織中新霉素的含量。

新霉素Elisa試劑盒檢測步驟?

1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出，置于室溫（20~25℃）平 衡 30min 以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻。若試 劑中有晶體析出，回溫溶解后方可使用。?

2、取出需要數(shù)量的微孔板，將不用的微孔放入錫箔袋，保存 于 2~8℃。?

3、洗滌液在使用前也需回溫。?

4、編號：將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號，每個樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做 2 孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。?

5、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本：加標(biāo)準(zhǔn)品或樣本50μL 到對應(yīng)的微孔中， 然后加入新霉素酶標(biāo)物 50μL/孔，再加入新霉素抗試劑 50μL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置于 25℃避光環(huán)境中反應(yīng) 30min。?

6、洗板：小心揭開蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，用洗滌液250μL/ 孔，充分洗滌 4~5 次，每次間隔10s，用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破）。?

7、顯色：加入底物液 A 液 50μL/孔，再加入底物液 B 液 50μL/ 孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置 25℃，避光環(huán)境中反應(yīng) 15min。?

8、測定：加入終止液 50μL/孔，輕輕振蕩混勻，設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm 處（建議用雙波長 450/630nm 檢測，請在 5min 內(nèi)讀完數(shù)據(jù)），測定每孔 OD 值（若無酶標(biāo)儀，則不加終止液用目測法可進(jìn)行判定）。

新霉素Elisa試劑盒注意事項(xiàng)?

1、室溫低于 20℃或試劑及樣本沒有回到室溫（20~25℃）會導(dǎo) 致所有標(biāo)準(zhǔn)的 OD 值偏低。?

2、在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況，則會出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性，重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行 下一步操作。?

3、每加一種試劑前需將其搖勻。?

4、反應(yīng)終止液為 2M 硫酸，避免接觸皮膚。?

5、不要使用過了有效日期的試劑盒；也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑，摻雜使用過了有效期的試劑盒會引起靈敏度降低；不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。?

6、儲存條件：保存試劑盒于 2~8℃，不要冷凍，將不用的酶標(biāo)板微孔板放進(jìn)錫箔袋重新密封。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。?

7、試劑變質(zhì)的跡象：底物液有任何顏色表明底物液變質(zhì)，應(yīng)當(dāng) 棄之。0 標(biāo)準(zhǔn)的吸光度（450/630nm）值小于 0.5（A450nm<0.5） 時，表示試劑可能變質(zhì)。?

8、加入底物液 A 液和底物液 B 液后，一般顯色時間為 15min 即可。若顏色較淺，可延長反應(yīng)時間到 20min。反之，則減短反應(yīng)時間。?

9、濃縮洗滌液如有結(jié)晶屬正?，F(xiàn)象，請加熱溶解后使用。?

10、該試劑盒最佳反應(yīng)溫度為 25℃，溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。

貯藏條件及有效期

貯藏條件：保存試劑盒于 2~8℃。

有效期：該產(chǎn)品有效期為 12 個月。