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近期，有不少使用PCR技術(shù)的用戶向我們咨詢CMA、CNAS擴項對實驗室的要求，以及分子實驗室常見的污染源及控制措施。接下來我們將匯總的問題一一跟大家解答分享。

1、分子實驗室布局可參考的標準有哪些？

分子檢測實驗室建設(shè)可參考的有以下文件：

（1）衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)〔2010〕194號1附件：醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室工作導(dǎo)則。

（2）GB/T27403-2008 《實驗室質(zhì)量控制規(guī)范 食品分子生物學(xué)檢測》。

（3）GB 19489-2008《實驗室生物安全通用要求》。

（4）WS233-2017 《病原微生物實驗室生物安全通用準則》。

（5）CNAS-GL42：2016《基因擴增領(lǐng)域檢測實驗室認可指南》。

2、分子實驗室的幾個區(qū)可以合并嗎？

根據(jù)衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)〔2010〕194號 -臨床基因擴增檢驗實驗室區(qū)域設(shè)計原則。原則上臨床基因擴增檢驗實驗室應(yīng)當(dāng)設(shè)置以下區(qū)域：試劑儲存和準備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)。?這4個區(qū)域在物理空間上必須是完全相互獨立的?！杜R床基因擴增檢驗實驗室區(qū)域設(shè)計原則》中提到，可根據(jù)使用儀器的功能，區(qū)域可適當(dāng)合并。

例如當(dāng)使用實時熒光PCR儀進行檢測時，擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)可合并為一個區(qū)；采用樣本處理、核酸提取及擴增檢測為一體的自動化分析儀，則標本制備區(qū)、擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)可合并。

3、PCR操作中常見的污染有哪些？

污染原因/特點及防控措施

?PCR操作中常見的污染有PCR產(chǎn)物污染、樣品污染、耗材污染、氣溶膠污染等，具體介紹如下：

（1）PCR產(chǎn)物造成污染，拷貝量大、數(shù)量多，發(fā)生在儀器處，容易出現(xiàn)假陽性。需要盡量避免在PCR反應(yīng)室開啟產(chǎn)物蓋子、PCR產(chǎn)物反應(yīng)后立即處理、定期擦洗儀器。

（2）樣品污染，由于樣品本身存放、制樣容器、提取過程交叉污染造成。建議制樣過程把控、制樣容器用3%過氧化氫浸泡、超聲清洗。

（3）移液器污染，引發(fā)原因有：反復(fù)用力吸打、沒有定期擦洗檢修移液器、連續(xù)操作大量樣本、吹吸高濃度陽性對照。建議制樣過程把控、制樣容器3%過氧化氫浸泡、超聲清洗、操作連續(xù)大量樣本時用過濾吸頭。

（4）氣溶膠污染，由于劇烈震動反應(yīng)管、突然開蓋、反復(fù)吹吸引起，大力吸樣一個氣溶膠顆?？蓴y帶48000個拷貝。建議震蕩后短暫離心再開蓋、避免反復(fù)吹吸、連續(xù)大量樣本時用過濾吸頭。

4、PCR操作全過程的污染防控原則和措施介紹

（1）合理的實驗室分區(qū)，試劑貯存和準備區(qū)，樣品制備及體系配制區(qū)，擴增區(qū)，擴增產(chǎn)物分析區(qū)。

（2）PCR試劑應(yīng)在裝有紫外燈的超凈工作臺或負壓工作臺中配制和分裝存儲，分裝應(yīng)標明時間、種類和編號。

（3）實驗后清潔，實驗臺表面、離心機、移液槍用10%次氯酸鈉消毒，桌椅用75%乙醇擦拭，定期打開紫外燈對空氣進行消毒。

大家如果還有關(guān)于微生物檢驗相關(guān)的問題可以留言給我們，我們會請教專家或我們研發(fā)老師，之后分享答案哈。