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β-內(nèi)酰胺酶的常規(guī)檢測(cè)方法有杯蝶法和膠體金快速試紙條法，而膠體金快速試紙條法因方便快捷，經(jīng)濟(jì)高效，被廣泛使用。因此，有效掌握β-內(nèi)酰胺酶快速檢測(cè)試紙條的使用尤為重要。

今天的小課堂，咱們就主要來(lái)看看β-內(nèi)酰胺酶快速檢測(cè)試紙條在使用過(guò)程中的常見(jiàn)問(wèn)題排查。

為什么樣品中不含β-內(nèi)酰胺酶，而檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，造成檢測(cè)結(jié)果假陽(yáng)性的因素有哪些？

假陽(yáng)性原因可能為：

1. 檢測(cè)過(guò)程中移液器槍頭，手套或者加熱器污染β-內(nèi)酰胺酶，并帶入到待測(cè)樣品中，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果偏高。

2. 由于保存條件或其他環(huán)境因素的影響，使得白色微孔內(nèi)抗生素有一定程度的降解，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果偏高。

3. 在取出白色微孔，撕開(kāi)封膜的過(guò)程中，用力不當(dāng)致使白色微孔內(nèi)容物灑出，抗生素含量減少，從而檢測(cè)結(jié)果假陽(yáng)性。

4. 待測(cè)樣品在放置過(guò)程中有內(nèi)源性β-內(nèi)酰胺酶產(chǎn)生并釋放，導(dǎo)致出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。

5. 檢測(cè)過(guò)程中，不當(dāng)?shù)牟僮鞑襟E，比如檢測(cè)人員吸取奶樣超過(guò)200微升，白色微孔未溶解均勻，或者延長(zhǎng)第一步9分鐘孵育時(shí)間，都有可能造成檢測(cè)結(jié)果偏高。

為什么樣品中含有β-內(nèi)酰胺酶，而檢測(cè)結(jié)果為陰性，引起檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)假陰性的因素有哪些？

原因可能為：

1. 樣品儲(chǔ)存條件不當(dāng)，比如高于室溫長(zhǎng)時(shí)間存放，導(dǎo)致β-內(nèi)酰胺酶降解。建議檢測(cè)的樣品要存放在4℃，且存放時(shí)間不超過(guò)3天。

2. 樣品中添加的疊氮化鉀和重鉻酸鉀類(lèi)的防腐劑，舒巴坦和克拉維酸等酶抑制劑以及酸敗或者添加堿類(lèi)物質(zhì)都會(huì)對(duì)檢測(cè)造成干擾，使得檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)假陰性的可能。

3. 檢測(cè)區(qū)內(nèi)的物品，像加熱器，移液器，槍頭等污染β-內(nèi)酰胺類(lèi)的抗生素，會(huì)使酶活性受到抑制，從而檢測(cè)結(jié)果偏低。尤其剛測(cè)完β-內(nèi)酰胺類(lèi)的抗生素后要完成清場(chǎng)工作。

4. 檢測(cè)人員不正確的操作步驟，比如取樣量明顯小于200微升，或者第一步孵育時(shí)間不足9分鐘，或者加熱器溫度不到40℃等，都有可能造成檢測(cè)結(jié)果偏低。

為什么檢測(cè)β-內(nèi)酰胺酶的過(guò)程中，檢測(cè)結(jié)果時(shí)而陰性，時(shí)而陽(yáng)性，出現(xiàn)陰陽(yáng)反復(fù)的情況？

1. 樣品中有一定含量的β-內(nèi)酰胺酶，而且其活性恰好在試紙條檢測(cè)的臨界值，環(huán)境條件或者人為操作的波動(dòng)使得檢測(cè)結(jié)果陰性和陽(yáng)性反復(fù)出現(xiàn)。

2. 樣本自身理化性質(zhì)的不穩(wěn)定，比如脂肪聚集，內(nèi)部不溶物顆粒等因素使得取樣不均勻，檢測(cè)的樣品結(jié)果有差異。

3. 白色微孔中抗生素受潮或蒸發(fā)，抗生素含量的參差不齊也會(huì)對(duì)結(jié)果造成影響。

4. 檢測(cè)過(guò)程中取樣量的多少，隨意縮短和延長(zhǎng)孵育時(shí)間都會(huì)使檢測(cè)結(jié)果發(fā)生波動(dòng)。

檢測(cè)結(jié)果和其他廠(chǎng)家產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果不一致怎么辦？

1. 首先，先確定兩種檢測(cè)方法或者兩個(gè)檢測(cè)產(chǎn)品檢測(cè)限是否一致，產(chǎn)品A檢測(cè)限是2U/mL，產(chǎn)品B檢測(cè)限4U/mL，若樣品中酶活性3U/mL，產(chǎn)品A檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性，而產(chǎn)品B檢測(cè)結(jié)果則為陰性。

2. 確定檢測(cè)方法完全按照說(shuō)明書(shū)要求完成，產(chǎn)品A和產(chǎn)品B說(shuō)明書(shū)中取樣量，孵育溫度和時(shí)間等可能不完全一致，一定要按照各自說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

3. 檢測(cè)的樣品要一致，儲(chǔ)存條件要合適。同樣的奶和加工后的奶粉檢測(cè)結(jié)果不一定完全一致。