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概要?

L-羥脯氨酸是膠原蛋白（皮革水解蛋白）特有的氨基酸， 皮革水解蛋白是利用皮革下腳料，經(jīng)水解而生成的一種粉狀物， 其本身對人體健康無害，但若使用經(jīng)鞣制、染色等手段處理過 的皮革制備的“蛋白粉”則會混進(jìn)大量的重鉻酸鉀和重鉻酸 鈉等有毒物質(zhì)，若長期食用含這種“皮革水解蛋白粉”的食 物，會對人體健康產(chǎn)生嚴(yán)重危害。因此國家禁止在乳及乳制品 中添加皮革水解蛋白。 由于牛奶中并不含此氨基酸，所以一般乳與乳制品中是否 摻有皮革水解蛋白可通過檢測 L-羥脯氨酸來鑒定。本公司開 發(fā)的 L-羥脯氨酸檢測試劑盒可特異性檢測牛奶中的羥脯氨酸 的含量。

實(shí)驗(yàn)原理及范圍?

樣本經(jīng)水解后釋放出 L-羥脯氨酸，L-羥脯氨酸經(jīng)活化劑活 化后，會與底物液反應(yīng)呈現(xiàn)出特有的顏色，與標(biāo)準(zhǔn)曲線對比后， 再乘以其相應(yīng)的稀釋倍數(shù)，即可得出樣本中 L-羥脯氨酸的含量。?

適用范圍?

可定量檢測成品奶、生鮮奶、奶粉中 L-羥脯氨酸的含量。

溶液的配制?

具體操作請參考說明書

檢測步驟?

1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出，置于室溫（20~25℃）平 衡 30min 以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻。?

2、取出需要數(shù)量的微孔板。?

3、編號：將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號，每個(gè)樣本和標(biāo) 準(zhǔn)品做 2 孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。?

4、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本：向微孔板中加入 100μL 標(biāo)準(zhǔn)品/樣本。?

5、加活化劑即用液：向標(biāo)準(zhǔn)品及樣本微孔中加入 75μL 活化 劑即用液，并充分混勻，蓋上蓋板膜，室溫避光條件下孵 育 5min。

6、顯色：向標(biāo)準(zhǔn)品及樣本微孔中加入 75μL 底物即用液，輕 微振蕩混勻，蓋上蓋板膜，于 70℃烘箱孵育 30min。?

7、測量：于波長 550 或 560nm 下測定，請?jiān)?10 min 內(nèi)讀完 數(shù)據(jù)。

結(jié)果判定

使用 4 參數(shù)方法（4p）構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線，從標(biāo)準(zhǔn)曲線中讀 出稀釋后樣本中 L-羥脯氨酸的濃度，再乘以其相應(yīng)的稀釋倍 數(shù)即可得到樣本中 L-羥脯氨酸的含量。